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全基因组甲基化WGBS
产品简介
全基因组甲基化测序(WGBS,Whole-genome bisulfite sequencing)是一种被广泛研究的表观遗传修饰方式,结合了亚硫酸氢盐转化方法与新一代高通量测序技术,与组蛋白修饰等方式一起,可在单碱基分辨率水平上检测全基因组DNA甲基化状态,在调控基因表达和染色质构象等方面发挥了重要作用。用重亚硫酸盐(Bisulfite)处理,将基因组中未发生甲基化的C碱基转换成U,通过接头序列介导的PCR技术将U转变为T,与原本具有甲基化修饰的C碱基区分开来,再结合高通量测序技术与参考序列比对,进而判CpG/CHG/CHH 位点是否发生甲基化。

图1 WGBS文库构建流程
实验流程

技术优势
(1)单碱基分辨率:可以精确到单碱基分辨率,精确分析每一个C碱基的甲基化状态;
(2)全基因组覆盖:最大限度地获取完整的全基因组甲基化信息,精确绘制甲基化图谱;
(3)适用范围广:适合所有有参物种,适合各种类型样本;
应用方向
构建全基因组甲基化图谱:WGBS可以最大限度地获取完整的全基因组甲基化信息,绘制精确的单碱基分辨率甲基化图谱,这对于揭示物种基因组甲基化的整体特征具有重要意义。
筛选疾病生物标志物:WGBS可用于研究胚胎发育、衰老等生理活动发展的表观遗传机制,筛选与这些过程相关的甲基化分子标志物。这些标志物在疾病诊断、预后评估以及个性化治疗等方面具有潜在的应用价值。
动植物育种研究:WGBS可用于研究植物或畜禽发育过程中全基因组DNA甲基化的变化,为培育高产、优质、抗逆的动植物新品种提供理论依据。
跨物种甲基化水平比较:通过比较不同物种之间的甲基化模式,可以揭示物种间的表观遗传差异和进化关系。
分析内容
1.数据质量评估 | 1.数据质量评估 |
2.参考基因组比对 | 2.2比对区域分布 |
2.3比对可视化 | |
3.单样本甲基化分析 | 3.1染色体甲基化统计 |
3.2基因组甲基化环图 | |
3.3基因甲基化图谱 | |
3.4单样本甲基化统计 | |
4.DMRs分析 | 4.1基于基因的DMRs分析 |
4.2基于miRNA的DMRs分析 | |
4.3重复序列DMRs分析 | |
4.4基因的KEGG注释 |
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